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綜合評價C18色譜柱性能的實驗方法介紹
點擊次數：3561 發布時間：2013-05-17
液相色譜中使用C18柱的反相色譜法以生物體相關物質為分析對象，能夠滿足主要研究領域的需要，使用。而隨著硅膠原料、鍵合方式、封尾方式的不同，生產出的色譜柱性能也不同，市場上則因此有數以百計性能不同的C18柱。而評價這些色譜柱的性能一般需要從以下4點入手：
1、對化合物的保留能力；
2、對酸性及中性化合物的理論塔板數和峰形；
3、對性（堿性）化合物的峰形；
4、對配位化合物的峰形。
針對上述四點原則，本公司建立了統一的標準，以此來評價自己生產的C18色譜柱。
具體測定方法如下：
樣品：尿嘧啶-甲苯-苯乙烷-阿米替林-醌茜五種物質混合物；
CoMetro液相色譜儀-等度系統（包括：6000LDI恒流泵，6000PVW紫外/可見可編程檢測器）；
紫外/可見檢測器：波長210nm；
流動相：5mmol/L磷酸鹽緩沖液（pH=7）-甲醇=20:80；
流速：1.0mL/min；
柱溫：25℃
在此方法下，這五種物質的色譜行為都能夠側面反映色譜柱某一項性能的大致情況，有較好的科學性和說服力，這五種物質的結構是及具體作用如下：
| 尿嘧啶
| 典型的性化合物，親水性*，在C18色譜柱中幾乎沒有保留，則可以用來測定系統的死時間。 |
| 甲苯/苯乙烷
| 非性化合物，不會與C18色譜柱中的殘余硅羥基作用，則可以用來標定色譜柱的理論塔板數，同時其峰形良好也是對色譜柱的基本要求。 |
| 阿米替林
| 含氮有機堿，在中性環境下能形成穩定的氮正離子，能與色譜柱中的殘余硅羥基形成靜電作用，其拖尾因子能側面反映色譜柱殘余硅羥基的數量。 |
| 醌茜
| 典型的螯合物，能與色譜柱中的金屬離子作用，其拖尾因子則可以側面反映出色譜柱中金屬離子的含量。 |
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